北海道システム・サイエンス株式会社
sgRNAに化学修飾を導入することによりゲノム編集効率が大幅に上昇することが報告されています。

特長 2

全長sgRNA化学合成のメリット

北海道システム・サイエンス株式会社はアジレント・テクノロジー株式会社が開発した、ゲノム編集効率を高める化学修飾sgRNAの合成サービス(SureGuide Chemically Synthesized sgRNA)を提供いたします。
HPLC 精製による高純度sgRNAなので、安定した効果と高い活性が期待できます。
  • カスタム配列をオーダーするだけ
    新しくsgRNA を設計するたびにin vitro 転写などの作業を行う必要がありません。
 
  • スケールアップも簡単
    sgRNAの必要量に応じて、200 μg~100 mg のオーダーが可能です。
 
  • 化学修飾の導入が可能
    sgRNAの安定性や活性を向上させる化学修飾を入れることができます。
 
  • 高純度のsgRNAが得られる
    アジレント社独自のケミストリーとHPLC精製により、高純度のsgRNAが得られます。

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北海道システム・サイエンス株式会社
〒001-0932 北海道札幌市北区新川西2条1丁目2-1
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sgRNAの5’・3’両末端に3塩基のMS修飾を導入することでゲノム編集効率が上昇する例が報告されています(文献2)。
化学的に修飾されたsgRNA により、ほとんど活性のない状態からでも細胞内での高頻度の挿入/ 欠失および相同組み換えが促進され(文献2)、ゲノム編集効率が大幅に向上することが報告されています。
M: 2’-O-methyl
アジレント社のRNA合成ケミストリーで sgRNA全長を合成することができます。

製品仕様

  •  RNA 120 merまでのカスタム配列に対応いたします。さらに長鎖のRNA合成をご希望の場合はご相談ください。
  •  化学修飾(M・MS)の導入が可能です。その他の化学修飾につきましてはご相談ください。
  • RNAの精製方法はHPLC精製となります。
  • 200 μg~100 mg(6 nmol - 3,000 nmol)の合成が可能です。

価格

参考文献

Publications
  1. Dellinger, D.J., et al. Streamlined Process for the Chemical Synthesis of RNA Using 2’-O-Thionocarbamate-Protected Nucleoside Phosphoramiditesin the Solid Phase, J. Am. Chem. Soc. 133, 11540‒11556 (2011); DOI: 10.1021/ja201561z
  2. Hendel, A., et al. Chemically modified guide RNAs enhance CRISPR-Cas genome editing in human primary cells. Nature Biotechnology, Vol. 33 No. 9 (2015); DOI: 10.1038/nbt.3290
  3. Ryan, D.E., et al. Improving CRISPR‒Cas specificity with chemical modifications in single-guide RNAs.
    Nucleic Acids Research, Vol. 46, No. 2 (2018);DOI: 10.1093/nar/gkx1199
 
Agilent patent application (United States)
 
US20160289675, US20180051281 - Guide RNA with chemical modifications, Ryan, et al.
US20170355985 - High specificity genome editing using chemically modified guide RNAs, Dellinger, et al.

NGS関連サービス


化学合成ガイドRNA


アンプリコンシーケンスによるゲノム編集効率の確認
型番 品名 スケール 価格
G9454L Single Unit CgR - 200 μg 200 μg
80,000円(税別)
G9454M Single Unit CgR - 500 μg 500 μg
94,000円(税別)
>500 μg
お問い合わせ

化学修飾の種類

MS:2’-O-methyl 3’phosphorothioate

化学修飾の効果

* 120 merまで1本あたり一律の価格です。
* 化学修飾(M・MS)の費用を含みます。

【 納期 】 約1か月
【 納品形態 】 凍結乾燥品

製品:SureGuide Chemically Synthesized sgRNA

アジレント社では本技術の特許を出願済で、M・MS 修飾を加えた sgRNA の合成が可能です。

US20160289675, US20180051281 Guide RNA with chemical modifications
US20170355985 High specificity genome editing using chemically modified guide RNA
※ 図中のMSP(2’-O-methyl 3′thioPACE)修飾については、本サービスの対象外となります。

化学修飾の位置

  • M: 2’-O-methyl
  • MS:2’-O-methyl 3’phosphorothioate

特長 1

こちらの解析サービスにつきましては、専用フォームよりお問い合わせください。

Agilent Bioanalyzer のSmall RNA Assayキットを用いて、長さの異なるsgRNAサンプルを分析。

Agilent 1290 Infinity II クロマトグラフィーシステムにより、安定的に修飾された精製100mer sgRNA のHPLC クロマトグラム(ダイオードアレイ検出器、260 nm)。
最大144 ヌクレオチドのオリゴでも同様の結果が得られた。